Product Description
Buffer BL, TL, KB, Proteinase K, DNA Wash Buffer, Elution Buffer, ezBind DNA Mini Columns(4), collection tube(8), User Manual(1)
Introduction
Rangkaian produk EZgeneTM adalah sistem inovatif yang secara radikal menyederhanakan ekstraksi dan pemurnian asam nukleat dari berbagai sumber. Kunci dari sistem ini adalah matriks ezBindTM baru yang secara spesifik, tetapi secara reversibel, mengikat DNA atau RNA dalam kondisi optimal tertentu yang memungkinkan protein dan kontaminan lain dihilangkan. Asam nukleat mudah dielusi dengan air deionisasi atau buffer garam rendah.
Kit DNA Jaringan EZgeneTM menyediakan metode yang mudah dan cepat untuk isolasi DNA genom untuk PCR dan analisis Selatan yang konsisten. Hingga 30 mg jaringan hewan, sel kultur, potongan ekor tikus, dan jaringan yang disematkan parafin dapat segera diproses dalam satu waktu. Kit ini memungkinkan pemrosesan sampel satu atau beberapa secara bersamaan. Tidak perlu ekstraksi fenol / kloroform, dan langkah-langkah yang memakan waktu dihilangkan (misalnya pengendapan menggunakan isopropanol atau etanol). DNA yang dimurnikan dapat langsung digunakan untuk sebagian besar aplikasi seperti PCR, Southern Blotting, dan Restriction Enzyme Digestion.
Storage and Stability
Semua komponen Kit DNA Jaringan EZgeneTM dijamin setidaknya selama 12 bulan sejak tanggal pembelian jika disimpan sebagai berikut: Proteinase K -20 ° C yang dilarutkan, dan semua bahan lainnya pada suhu RT (22-25 ° C).
Binding Capacity
Setiap kolom mini DNA ezBindTM dapat mengikat sekitar 100 µg DNA. Menggunakan lebih dari 30 mg jaringan atau 1×107 sel tidak dianjurkan.
Kit Contents
| Catalog# |
GD2211-00 |
GD2211-01 |
GD2211-02 |
| Preps |
4 |
50 |
250 |
| ezBind DNA Mini Columns |
4 |
50 |
250 |
| collection tube |
8 |
100 |
500 |
| Buffer TL |
1.2 mL |
15 mL |
70 mL |
| Buffer BL |
1.2 mL |
15 mL |
70 mL |
| Buffer KB |
2.4 mL |
28 mL |
135 mL |
| DNA Wash Buffer** |
2 mL |
15 mL |
3 x 24 mL |
| Elution Buffer* |
2 mL |
15 mL |
70 mL |
| Proteinase K |
3 mg |
30 mg |
5 x 30 mg |
| User Manual |
1 |
1 |
1 |
*Elution Buffer = 10 mM Tris-HCl, pH 8.5
**Add 8 mL (GD2211-00) or 60 mL (GD2211-01) or 96 mL (GD2211-02) absolute ethanol (96-100%) to each DNA Wash Buffer bottle before use.
Safety Information
Buffer BL mengandung garam Chaotropic. Gunakan sarung tangan dan kacamata pelindung saat menangani solusi ini.
Before Starting
EZgeneTM Kits dirancang agar sederhana, cepat, dan andal asalkan semua langkah diikuti dengan tekun. Sangat disarankan agar Anda membiasakan diri dengan seluruh buklet sebelum memulai.
Important Notes
Susun kembali setiap vial Protease K 110 μL (GD2211-00), 1,3 mL (GD2211-01), atau 5 x 1,3 mL (GD2211-02) Elution Buffer. Vortex vial sebentar sebelum digunakan. Kami menganjurkan agar Anda alikuot, dan menyimpan botol Proteinase K pada suhu -20 ° C. Bawa larutan Proteinase K ke suhu kamar sebelum digunakan.
Encerkan DNA Wash Buffer dengan etanol absolut sebagai berikut:
Tambahkan 8 mL (GD2211-00) atau 60 mL (GD2211-01) atau 96 mL (GD2211-02) etanol absolut (96-100%) ke setiap botol.
Preheat Elution Buffer sampai 70 ° C (dalam alikuot 0,5 mL / sampel).
Untuk Mouse Tail Protocol, persiapkan yang berikut ini: Larutan pra-campuran 220 μL Buffer BL dan 220 μL etanol absolut (per sampel). Campur dengan vortexing. Mereka dapat disiapkan segar, atau dibuat sebelumnya dan disimpan pada suhu kamar kurang dari satu bulan.
Materials and Reagents to be supplied by user
- Tabletop microcentrifuge.
- Sterile 1.5 mL centrifuge tubes.
- Shaking water-bath set to 55°C for Tissue Protocol; 65°C for Cultured Cells; 55°C for Mouse Tail.
- RNase Stock Solution (100 mg/mL) (OPTIONAL).
- Absolute Ethanol (96-100%).
- PBS Buffer.
Determination of Yield and Quality
Hasil DNA total dapat ditentukan dengan spektrofotometer menggunakan air deionisasi, Buffer Tris-HCl, atau Buffer Elusi sebagai blanko. Konsentrasi DNA dihitung sebagai:
[DNA] = (Absorbance260) x (0,05 µg / µL) x (Faktor Pengenceran)
Kualitas DNA dapat dinilai dengan mengukur absorbansi pada 260 nm dan 280 nm. Rasio A260 / A280 1,7-1,9 sesuai dengan kemurnian 85% -95%.
Hasil yang diharapkan bervariasi dengan jumlah dan jenis jaringan yang digunakan.
Biasanya, 30 mg jaringan segar akan menghasilkan 10 ~ 40 µg DNA dengan dua elusi (masing-masing 200 µL).
Concentrate DNA
Jika perlu, DNA bisa terkonsentrasi sebagai berikut. Tambahkan natrium klorida untuk mencapai konsentrasi akhir 0,1 M diikuti dengan 2 x volume etanol absolut (96-100%). Aduk rata dan inkubasi pada -20 ° C selama 10 menit. Sentrifugasi pada 10.000 x g selama 15 menit dan buang supernatan. Tambahkan 700 μL etanol 70% dan sentrifugasi pada 10.000 x g selama 2 menit. Buang supernatan, keringkan pelet dengan udara selama 2 menit, dan tahan kembali DNA dalam 20 μL air deionisasi steril atau 10 mM Tris-HCl, pH 8,5.
Operating Protocol
MORE INFO :
——————————————
Website : www.bmdstore.com
No Kantor : 021-2943 2095
No HP : 0813 1754 7882
Email : [email protected]
