Product Description
Express Endofree Plasmid Maxiprep
pengantar
Kunci kit ini adalah sistem pengikatan DNA milik kami yang memungkinkan pengikatan DNA yang sangat efisien ke matriks ezBindTM kami, sementara protein dan kotoran lainnya dihilangkan dengan Wash Buffer. Asam nukleat mudah dielusi dengan air steril atau Elution Buffer.
Tidak seperti kit lain di pasaran, tidak ada garam chaotropic yang terkandung dalam buffer kit pemurnian plasmid kami yang telah dipatenkan. DNA yang dimurnikan adalah bebas residu resin penukar guanidin / anion.
Sistem endofree EZgeneTM menggunakan buffer yang diformulasikan secara khusus yang mengekstrak endotoksin dari lisat bakteri. Tingkat endotoksin kurang dari 0,1 EU (Endotoksin) per µg DNA plasmid.
Kit ini dirancang untuk pemurnian DNA plasmid yang cepat dan efisien dari 100 hingga 200 mL kultur E. coli. Kolom maxi memiliki kapasitas pengikatan DNA plasmid 1000 µg.
Endofree DNA yang dimurnikan siap untuk kinerja tinggi aplikasi hilir seperti transfeksi sel kuat seperti transfeksi garis sel sensitif endotoksin, sel biakan primer atau injeksi mikro.
Catatan penting
Nomor Salinan Plasmid: Hasil DNA plasmid tergantung pada asal replikasi dan ukuran plasmid. Protokol dioptimalkan untuk pemurnian plasmid nomor salinan tinggi. Untuk plasmid dengan jumlah salinan rendah, volume kultur dan volume buffer perlu ditingkatkan 2 kali. Silakan hubungi customer service kami untuk informasi lebih lanjut dan referensi Tabel 1 untuk plasmid yang umum digunakan,
Tabel 1 Plasmid yang umum digunakan dan hasil yang diharapkan.
| Plasmid | Origin | Copy Numbers | Expected Yield
(µg per 50 mL) |
| pSC101 | pSC101 | 5 | 5 |
| pACYC | P15A | 10-12 | 5-10 |
| pSuperCos | pMB1 | 10-20 | 10-20 |
| pBR322 | pMB1 | 15-20 | 10-20 |
| pGEMR | Muted pMB1 | 300-400 | 100-150 |
| pBluescriptR | ColE1 | 300-500 | 100-200 |
| pUC | Muted pMB1 | 500-700 | 150-250 |
| EndA- Strains of E. Coli | |||||||||||||
| DH5α | DH1 | DH21 | JM106 | JM109 | SK2267 | SRB | XLO | ||||||
| TOP10 | DH10B | JM103 | JM107 | SK1590 | MM294 | Stbl2TM | XL1-Blue | ||||||
| BJ5182 | DH20 | JM105 | JM108 | SK1592 | Select96TM | Stbl4TM | XL10-Gold | ||||||
| EndA+ Strains of E. Coli | |||||||||||||
| C600 | JM110 | RR1 | ABLE® C | CJ236 | KW251 | P2392 | BL21(DE3) | ||||||
| HB101 | TG1 | TB1 | ABLE® K | DH12STM | LE392 | PR700 | BL21(DE3)
pLysS |
||||||
| JM101 | JM83 | TKB1 | HMS174 | ES1301 | M1061 | Q358 | BMH 71-18 | ||||||
| All NM strains | All Y strains | ||||||||||||
Massa Sel Optimal (OD600 x mL Kultur): Prosedur ini dirancang untuk mengisolasi plasmid yang ditumbuhkan dalam media LB standar (Luria Bertani) selama 12-16 jam hingga kepadatan OD600 2.0 hingga 3.0. Jika media kaya seperti TB atau 2xYT digunakan, pastikan kepadatan sel tidak melebihi 3.0 (OD600). Rasio biomassa yang tinggi terhadap buffer lisis menghasilkan hasil dan kemurnian DNA yang rendah. Kolom maxi memiliki biomassa optimal 500-1000. Misalnya, jika OD600 adalah 3.0, volume kultur optimal harus 100 sampai 200 mL.
Volume Kultur: Gunakan labu atau tabung dengan volume 4 kali lebih besar dari media kultur untuk memastikan kondisi optimal untuk pertumbuhan bakteri. Jangan melebihi volume kultur maksimum yang disarankan dalam protokol. Lisis yang tidak lengkap karena jumlah kultur bakteri yang berlebihan menghasilkan hasil yang lebih rendah dan kemurnian yang lebih rendah.
Penyimpanan dan Stabilitas
Buffer A1 harus disimpan pada suhu 4 ° C setelah RNase A ditambahkan dan Buffer ER harus disimpan pada suhu 4 ° C. Semua bahan lainnya dapat disimpan pada suhu kamar (22-25 ° C). Umur simpan yang dijamin adalah 12 bulan sejak tanggal pembelian.
Penting
RNaseA: Ini adalah bentuk yang stabil atau setengah hari ketika disimpan pada suhu kamar. Tampilkan RNaseAvial secara singkat. TambahkanRNaseAsolutiontoBufferA1dan campur dengan baik sebelum digunakan.Simpan pada4 ° C.
BufferB1berprecipitates di bawah suhu kamar. Diskritkritistowarmupthebufferat50 ° Cuntukmenghapusseperti yangsebelum digunakan.
BufferN3mungkin bentukprecipitatesdi bawah10 ° C, hangatupat37 ° Cuntukmenghapusresepipitatessebelum digunakan.
KeepthecaptightlyclosedforBufferB1setelah digunakan.
Memastikan ketersediaan centrifuge (13.000 rpm). Khususnya, setelah mencampurkannya dengan etanol, sampel sampel diproses segera dengan sentrifugasi.
Lakukan semua sentrifugasi pada suhu kamar.
Bahan dipasok oleh pengguna
100% etanol
Centrifuge kecepatan tinggi
50mL tabung sentrifugal berkecepatan tinggi
50mL tabung kerucut
IsopropanolifprecipitatetheplasmidDNA.
——————————————
Website : www.bmdstore.com
No Kantor : 021-2943 2095
No HP : 0813 1754 7882
Email : [email protected]
